Optimización de la plataforma para dispositivos de diagnóstico liofilizados LAMP: desarrollo de un kit para la detección de malaria en el Perú

Durante la pandemia de la COVID-19 nuestro equipo desarrolló y fabricó un kit en formato liofilizado basado en la metodología de amplificación isotérmica mediada en lazo de transcriptasa reversa (RT-LAMP) para la detección molecular de SARS-CoV-2 (Kit RT-LAMP SARS-CoV-2 Liofilizado), alcanzando un nivel de maduración tecnológica TRL 7 y encontrándose en estudios de estabilidad. Dicho proyecto fue financiado por PROCIENCIA (contrato 021-2021) y en el marco de su ejecución, el Instituto Nacional de Salud (INS) adquirió un equipo liofilizador. Una gran limitación en muchas regiones es garantizar la cadena de frío. En ese sentido, el formato liofilizado ofrece una ventaja operativa ya que el reactivo deshidratado puede transportarse a temperatura ambiente. Nuestro equipo de investigación busca consolidar la línea de I+D+i de dispositivos de diagnóstico liofilizados con el fin de fortalecer la capacidad diagnóstica de enfermedades de prioridad nacional. La innovación y tecnología alcanzadas en el desarrollo del Kit RT-LAMP SARS-CoV-2 Liofilizado pueden ser optimizadas para su aplicación en otras enfermedades prevalentes y de importancia para la salud pública en el Perú, como lo es la malaria. Malaria es uno de los problemas de salud pública más importantes a nivel global y nacional. Desde la implementación del Plan Malaria Cero en el año 2018 hasta el 2020, se ha logrado disminuir los casos en la Región de Loreto, la más afectada. Sin embargo, a consecuencia de la pandemia del SARS-CoV-2 hay una disminución de las actividades de control del Plan Malaria Cero, por lo que los logros alcanzados hasta la fecha se ven amenazados. Se ha observado un incremento de casos por P. falciparum en Amazonas, por ejemplo. El grupo de los niños y jóvenes son los más afectados. La población de 0 a 17 años concentró el 58.15% de los casos de malaria en el 2019 y el 60.24% en el 2020. La disparidad en la distribución de servicios de salud, el recurso humano en salud, y de la infraestructura sanitaria, sumados al difícil acceso geográfico de muchas zonas endémicas de malaria causa un limitado acceso al diagnóstico y tratamiento oportuno. Las poblaciones originarias de la Amazonía son las más afectadas; el 74.6% de los casos totales de malaria en el 2020 se encuentra en distritos de estas comunidades. Las personas sintomáticas que buscan atención son la punta del iceberg, ya que en zonas endémicas aquellas asintomáticas que no buscan atención son la mayoría y al no recibir tratamiento se constituyen en un reservorio silencioso del parásito. La falta de disponibilidad de microscopía de gota gruesa en muchos lugares, obliga a usar pruebas de diagnóstico rápido. Pero las parasitemias más bajas están por debajo del límite de detección de la microscopía o pruebas rápidas actuales. Sin embargo, las pruebas moleculares requieren infraestructura y personal muy capacitado, condiciones que no se encuentran en muchas zonas con alta transmisión de malaria. La metodología de amplificación isotérmica mediada en lazo (LAMP) emplea dos juegos de cebadores o primers especialmente diseñados para reconocer seis secuencias distintas del material genético objetivo. Requiere de una ADN polimerasa con actividad de desplazamiento, lo cual garantiza alta especificidad para la amplificación. A diferencia de la PCR la amplificación isotérmica de ácidos nucleicos trabaja a una temperatura constante (60-65 ºC); la lectura de los resultados puede ser sencilla; llega a tener alta sensibilidad y especificidad; rapidez en su ejecución, bajo costo y facilidad de aplicación; y tolera posibles contaminantes o inhibidores. Nuestro proyecto busca optimizar la plataforma para dispositivos de diagnóstico liofilizados basados en la metodología LAMP desarrollada para el SARS-CoV-2 en el INS mediante el desarrollo de un kit LAMP liofilizado para la detección de malaria (Kit Lio Malaria). El proyecto incluye cuatro etapas. Primero, la etapa de Diseño y Desarrollo en la cual se harán me