Evaluación del estrés oxidativo durante la colecta y manejo inicial de semen de alpaca y su efecto sobre la capacidad fecundante espermática

Investigaciones realizadas con espermatozoides congelados de alpaca, señalan que el aumento de especies reactivas de oxígeno (ROS), y por ende el estrés oxidativo, es una de las causas más importantes de la disminución de la capacidad fecundante. En CSA, durante la monta natural, la eyaculación se realiza a nivel intrauterino en un ambiente libre de oxígeno. Por otro lado, el plasma seminal, de consistencia viscosa, inmoviliza al espermatozoide, disminuyendo así su gasto metabólico, durante 26 a 32 horas. Sin embargo, cuando se realiza la colecta y el manejo inicial de una muestra de alpaca, se fuerza a los espermatozoides a enfrentar un ambiente saturado de oxígeno y se lo extrae de su agente protector natural (el plasma seminal), lo cual podría estimular el aumento de los niveles de ROS y producir una pérdida gradual de la capacidad fecundante del espermatozoide. El presente estudio tiene por objeto evaluar el estrés oxidativo durante la colecta y manejo inicial de semen de alpaca y su efecto sobre la capacidad fecundante espermática. Para dicha evaluación se obtendrá un total de 270 muestras seminales provenientes de 10 machos alpaca de fertilidad comprobada. Se realizará un muestreo aleatorio simple empleando una lista numerada, con la cual se establecerá a cuál de los 9 grupos experimentales será distribuido el macho reproductor para la colecta (vagina artificial, electroeyaculación y aspiración post coital) y procesamiento de la muestra de semen (técnica manual con aguja hipodérmica, centrifugación y digestión enzimática). Midiendose los niveles de ROS: inmediatamente después de la colecta, antes y después de la eliminación de la viscosidad del plasma seminal. Para corroborar el daño oxidativo, se procederá a evaluar: viabilidad, motilidad, potencial de membrana mitocondrial, fragmentación de ADN y peroxidación lipídica, las mismas que serán evaluadas mediante ANOVA de medidas repetidas post –test prueba de Tukey. Finalmente, se realizará la fecundación in vitro la cual será correlacionada con los valores de ROS y estrés oxidativo, mediante la Chi cuadraro y correlación de Pearson. Una vez obtenidos los resultados podremos especificar cuál de las técnicas de colecta y de eliminación de la viscosidad de plasma seminal produce mayor o menor estrés oxidativo y/o pérdida de capacidad fecundante, lo cual servirá como base para implementar estrategias para diseñar posteriores protocolos de inseminación con semen congelado.