Caracterización de la actividad inhibitoria de la bacteria Pseudomonas entomophila (Pe) contra el hongo anuropatógeno Batrachochytrium dendrobatidis (Bd).

El objetivo principal es explorar la capacidad inhibitoria de Pseudomonas entomophila contra Batrachochytrium dendrobatidis. Esto se logra mediante el analizar bioquímico y molecular del perfil de expresión de Pe en presencia vs ausencia de Bd para identificar las moléculas de la primera más probablemente relacionadas con la inhibición del segundo. Los experimentos involucran el diseño y la producción de cebadores específicos para genes sospechosos. Así, por medio de PCR cuantitativo por transcriptasa reversa—y de espectrometría de masa que genera secuencias de novo de péptidos (sin necesidad de degradación Edman) en el caso de proteínas para estudios proteómicos—se evaluará colonias de Pe con diferente exposición a Bd cultivadas por triplicado para detectar expresión diferencial. Las principales moléculas sospechosas de inducir la inhibición (propuestas en base a investigaciones previas que lograron establecer su rol fungicida en otras Pseudomonas emparentadas) son las siguientes: 1. Cianuro de hidrógeno (cluster hcn); 2. Pioverdinas (coordenadas PSEEN1813-PSEEN1815 y PSEEN3224-3234); 3. Quitinasa (genes putativos propuestos previamente en Pe); 4. Fenazinas (clusters phz); 5. Pioluteorina (clusters plt). Encontrar causalidad entre la producción de estas moléculas y la inhibición parcial o total del crecimiento de Bd nos permitirá establecer la toxicodinamia que afecta a Bd y proponer tratamientos para prevenir infecciones o restaurar poblaciones de anuros infectados aprovechando los mecanismos de dicha toxicodinamia. Estos procedimientos pueden ser mediante producción masiva de las moléculas efectoras en reactores y administración cutánea o a través de microbiota nativa de cada especie genéticamente modificada para incrementar la producción de dichas moléculas.

DELGADO PEASE ,NICOLAS ENRIQUE