INMUNOLOGICAL AND TRANSCRIPTOMIC ANALYSIS OF PATTERNS OF LATENCY TUBERCULOSIS IN PERUVIAN INDIVIDUALS

1) Problema a investigar: La Tuberculosis es una enfermedad con alta incidencia e importancia en salud pública en nuestro país. Existen 2 estadios en la patogenésis de la tuberculosis: la infección latente o tuberculosis latente y la enfermedad o tuberculosis activa. 2) Justificación y relevancia: En la actualidad, no existen biomarcadores diferenciales entre los 2 estadíos. Así mismo, existen diferentes perfiles de infección latente: a) contactos intra-domiciliarios, personas que conviven con pacientes con tuberculosis y que presentan reacción positiva a la prueba de tuberculina (PPD) o algún ensayo inmunológico con liberación de interferón gamma (IGRA) y b) personas altamente expuestos a la bacteria y que son negativos a PPD e IGRAs, denominados clinicamente "resister". En este contexto, es necesaria las investigaciones relacionadas a perfiles de tuberculosis, con énfasis en infección latente, donde los análisis en transcriptómica brindan información de expresión genética que podrían ser usados como biomarcadores de diagnóstico. Además, se pueden identificar vías metabólicas relacionadas a respuesta inmune innata y adaptativa que explicarían el paso mas rápido de tuberculosis latente a tuberculosis activa. En este punto, se podría mejorar el tratamiento actual que incluye dosis de isoniacida. 3) Objetivos: Analizar la expresión diferencial de ARNs en controles sanos, pacientes con tuberculosis activa, pacientes con perfiles tuberculosis latente y pacientes tratados con isoniacida, 4) Metodología: 30 participantes (6 sanos, 6 con TB activa y 18 con TB latente) conformarán el estudio. La prueba de tamizaje diferencial para el estadio de TB latente será el ensayo de Quantiferon, el cual mide la liberación de Interferón gamma frente a una infección por Mycobacterium tuberculosis. Un valor mayor a 0.35 indicara positividad al ensayo. Los pacientes con tuberculosis activa serán seleccionados según ficha clínica y las manifestaciones de la enfermedad. Los controles sanos serán personas que no han tenido exposición a la bacteria. En una toma de muestra de sangre, se separara el suero, a partir del cual se aislara los exosomas presentes y de estos el ARN total con énfasis en ARN pequeños no codificantes. Desde el punto de vista inmunológico, se realizara un dosaje de citoquinas en los pacientes con TB latente y se comparara los resultados para poder identificar algunas citoquinas que solo se estén produciendo en este estadio. Así mismo, se realizará el secuenciamiento total de ARN mediante la metodología de RNAseq. Posteriormente se hará un análisis bioinformático de expresión diferencial de los ARNs y se evaluara por PCR en tiempo real los ARNs expresados diferencialmente. El estudio se desarrollará durante 36 meses y se incluirán 9 personal de salud y 9 contactos intradomiciliarios.