Generación de mutaciones genómicas estables en Sacha Inchi (Plukenetia volubilis L.) que atribuyan tolerancia a nematodo del nudo (Meloidogyne sp.) en la región San Martín

Objetivo general: Generar mutaciones genómicas estables en sacha inchi (Plukenetia volubilis L.) que atribuyan tolerancia o resistencia a nematodo del nudo (Meloidogyne sp.) en la Región San Martín. Metodología: C1: Determinar la dosis letal media (DL50) de agentes mutagénicos físicos y químicos para el tratamiento de semillas de sacha inchi (Generación de Mutantes 1). Semillas de sacha inchi de una línea mejorada por el Instituto de investigaciones de la Amazonia Peruana –San Martín (IIAP-SM), serán tratadas con diferentes dosis y tiempos de exposición a Metanosulfonato de Etilo - EMS (agente químico) y Radiación Gamma 60Co (agente físico), para cada ensayo se utilizara 100 semillas y 3 repeticiones. C2: Obtener un stock genético de semillas mutantes homocigotas y heterocigotas (Generación M2). Las semillas mutantes (M1) serán germinadas en cámaras almacigueras y repicadas a bolsas. Las plántulas con inicio de la guía serán transferidas a campo definitivo. Cada planta mutante M1 será autofecundada manualmente. Finalmente, se colectaran una capsula (5 semillas aproximadamente) por cada planta mutante M1, estas semillas serán mutantes 2 (M2). C3: Identificar y seleccionar plantas mutante tolerantes a nematodos del nudo en las generaciones M2 y M3. Las semillas mutantes M2 serán establecidas en un sistema de rizotrón con inoculo utilizado como sustrato. Las semillas M2 serán sembradas y la evaluación del sistema radicular de cada planta mutante M2 será realizado después de 45 días. Plantas seleccionadas tolerantes a nematodos del nudo serán establecidas en campo definitivo para la producción de semillas que serán llamadas de mutantes 3 (M3). Estas plantas M3 serán nuevamente crecidas en un sistema rizotron con sustrato infestado con nematodos, con el fin de reconfirmar su tolerancia a nematodos. Estas plantas M3 reconfirmadas serán finalmente establecidas en el Banco de Germoplasma del IIAP-SM. C4: Para caracterizar genéticamente plantas generación M2 tolerantes o resistentes a nematodos del nudo se llevaran los siguientes procedimientos: 1. Colecta de primordios foliares, 2. Extracción de ácidos desoxirribonucleicos (ADN); 3. Tratamiento enzimático utilizando enzimas de corte raro y corte frecuente; 4. Amplificación de DNA vía PCR utilizando marcadores universales AFLPs (Amplified Fragment Length Polymorphism); 5. Resolución de amplicons en geles de poliacrilamida al 6%; 5. Interpretación de polimorfismos encontrados (perfiles genéticos) sobre diferentes plantas M2 tolerantes a nematodo del nudo comparado con plantas no inducidas (sensibles a nematodos). Resultados esperados: Generar conocimientos y técnicas innovadoras en la generación de mutaciones genómicas estables en sacha inchi (Plukenetia volubilis L.) que atribuya tolerancia a nematodo del nudo (Meloidogyne sp.). Los resultados esperados del proyecto son: 1) Un Protocolo para el tratamiento de semillas de sacha inchi con EMS (Metanosulfonato de Etilo) y Radiación Gamma (Gy). 2) Un stock genético de al menos 100 000 semillas con mutaciones segregantes (M2) sobre una proporción fenotípica esperada (3:1). 3) Al menos 02 plantas mutantes de sacha inchi tolerantes al nematodo del nudo que serán incorporadas al Banco Nacional de Germoplasma del INIA. 4) Caracterización genética de plantas mutantes de sachi inchi tolerantes al nematodo del nudo. 5) 02 publicaciones sometidas en revistas indexadas. 6) Formación de jóvenes profesionales mediante la ejecución de tesis de Pre-grado, 7) Adiestramiento en técnicas y procesos del personal involucrado, garantizando de esta manera la formación y continuidad de cuadros especializados para continuar la línea de investigación. La Entidad Ejecutora es la Universidad Nacional de San Martín – Tarapoto. La UNIVERSIDADE SAGRADO CORAÇÃO (USC) BAURU/BRASIL, SHANANTINA S. A. C.