Evaluación de candidatos antigénicos recombinantes para la innovación del diagnóstico confirmatorio de la Enfermedad de Carrión.

Antecedentes. La enfermedad de Carrión, constituye uno de los principales problemas de salud pública en localidades endémicas de extrema pobreza del Perú, es causada por Bartonella bacilliformis y transmitida por mosquitos vectores del género Lutzomyia; los métodos de diagnóstico serológico actualmente disponibles utilizan proteínas totales del patógeno como antígeno, existiendo la posibilidad de reacciones cruzadas con microorganismos que presenten similares epítopos antigénicos con el agente causal. Objetivo: Producir proteínas recombinantes de Bartonella bacilliformis con alta capacidad antigénica para generar métodos de diagnóstico con mayor sensibilidad y especificidad. Métodos: Mediante herramientas bioinformáticas se analizará el genoma de B. bacilliformis obtenido de la base de datos NCBI y seleccionarán los genes asociados a la patogenicidad; las secuencias aminoacídicas traducidas de los genes serán empleadas para identificar proteínas ortólogas usando BLASTp. Las proteínas ortólogas asociadas a procesos patogénicos, serán evaluadas usando el servidor ExPasy, obteniendo la información de las propiedades fisicoquímicas que se utilizaran para la selección de proteínas candidatas. La predicción de epítopos de células B y células T se realizará utilizando el servidor BCPred y IEDB, respectivamente. Las proteínas candidatas serán expresadas en sistemas heterólogos, las proteínas intracelulares se expresaran en E. coli y las proteínas extracelulares serán expresadas en el sistema baculovirus-células de insecto. Los productos proteicos recombinantes serán purificados por cromatografía de afinidad y cromatografía de exclusión por tamaño. La capacidad antigénica de los productos purificados será evaluada utilizando suero de pacientes con diagnóstico positivo a la enfermedad de Carrión. Resultados esperados: Se espera obtener proteínas recombinantes que en la evaluación de sueros control positivo a Enfermedad de Carrión, incrementen los porcentajes de sensibilidad y especificidad del método de ELISA actualmente disponible en el INS. Las proteínas recombinantes producidas serán utilizadas en futuras investigaciones dirigidas al desarrollo de métodos rápidos de diagnóstico.