TRANSCRIPTOMICA DE CELULAS DE LA GRANULOSA Y OVOCITOS DURANTE LA FOLICULOGÉNESIS INICIAL EN ALPACA Y SU ASOCIACIÓN CON LA ACTIVACION FOLICULAR

Los factores que regulan la activación de folículos primordiales a folículos en crecimiento es un proceso poco esclarecido en camelidos sudamericanos. Sin embargo, el avance en la tecnología de las ciencias ómicas, como la transcriptómica, permite su comprensión y determinar los procesos celulares. El objetivo del proyecto es analizar la transcriptómica global y validación de genes asociados a la inducción de la activación de folículos primordiales en alpaca. El proyecto está dividido en cuatro fases experimentales: Fase I - Determinar los cambios poblacionales de folículos pre-antrales en alpaca. Fase II - Comparar la expresión génica global entre folículos primordiales y primarios y secundarios. Fase III - Validar los transcritos significativos identificado por RNAseq y Fase IV – Suplementar con proteínas de transcritos candidatos para inducir la activación in vitro de folículos primordiales. En la Fase I, serán utilizados ovarios en la etapa fetal (edad inicial) y de alpacas adultas (edad final). Los ovarios serán procesados por histología clásica y se hará el recuento de la población folicular pre-antral en las diferentes edades. Para la Fase II, serán aislados de la corteza ovárica células de la granulosa y ovocito de folículos primordiales, primarios y secundarios utilizando microscopía de láser. Las células aisladas serán enviadas para ser analizadas con RNAseq y, por último, a través de procesos bioinformáticos los genes expresados y comparados por tipo celular (ovocito entre célula de la granulosa) y por estadío de desarrollo (primordial, primario y secundario). En la Fase III, los genes diferencialmente expresados (estadísticamente significativos) serán validados por RT-qPCR. Finalmente en la fase IV, serán cultivados in vitro folículos primordiales, en un medio suplementado con las proteínas de los genes seleccionados en las fases anteriores que inducen la activación de folículos primordiales y así mejorar el aprovechamiento del germoplasma femenino.