Estudio funcional in vitro mediante CRISPR-Cas9 de la vía de ubiquitinación en el ciclo de vida de Leishmania tarentolae

La leishmaniasis es una enfermedad causada por parásitos tripanosomátidos del género Leishmania. Aunque existen tratamientos disponibles, estos presentan limitaciones como alta toxicidad, elevado costo y pérdida de eficacia debido a la resistencia parasitaria o a fallas terapéuticas clínicas. La necesidad urgente de nuevos fármacos contra la leishmaniasis requiere una investigación básica centrada en los procesos celulares que regulan el desarrollo de Leishmania. La vía ubiquitina-proteasoma ha cobrado relevancia como posible fuente de dianas terapéuticas. En este contexto, Leishmania tarentolae, parásito de reptiles no patógeno para humanos y de fácil cultivo, se presenta como un organismo modelo valioso para investigar mecanismos celulares conservados en Leishmania spp., a través del análisis de la función de genes de interés, que posteriormente pueden validarse en especies patógenas. Como hipótesis se plantea que la integración del análisis de predicción funcional de proteínas mediante biología computacional con la validación experimental mediante el sistema CRISPR-Cas9 permitirá identificar y caracterizar el rol de al menos una proteína sustrato candidata de la vía de ubiquitinación dependiente de UBC2 en la diferenciación de Leishmania tarentolae, específicamente en la transición de promastigote a amastigote axénico. La metodología propuesta combina el análisis computacional de predicción funcional de proteínas con la validación experimental mediante el sistema CRISPR-Cas9. El objetivo general del estudio consiste en estudiar el rol de al menos una proteína putativa del interactoma de la enzima UBC2 (enzima conjugadora de ubiquitina E2) de la vía de ubiquitinación en el desarrollo y la diferenciación in vitro del organismo modelo Leishmania tarentolae. Como resultados esperados se plantea establecer un modelo experimental en Leishmania tarentolae para el estudio funcional de genes mediante edición génica. Además, generará conocimiento sobre la biología de Leishmania, apoyando a la comunidad científica en la identificación de posibles dianas terapéuticas contra la leishmaniasis. Los resultados bibliográficos de esta investigación incluyen: dos (02) artículos científicos originales aceptados para publicación en revistas, preferentemente de acceso abierto, indizadas en Scopus o WoS en Q1 o Q2; dos (02) tesis finalizadas de postgrado (maestría) sustentadas durante el período de ejecución del proyecto, que conlleven la obtención de grados académicos en universidades peruanas; y, al menos una (01) ponencia/póster en congresos de alcance internacional.