Perfil molecular en organoides 3D de cáncer de mama para análisis de invasividad y potencial metastásico in vitro e in vivo

El cáncer de mama es la principal causa de muerte por cáncer entre las mujeres afroamericanas e hispanas . A nivel mundial es el más común y representa el 12,5 % de todos los nuevos casos anuales de cáncer en todo el mundo siendo la invasión y metástasis lo que lleva a la muerte. Debido a la ausencia de modelos no animales que puedan mejorar la comprensión de la progresión de este tumor, se utilizará la bioimpresión 3D de esferoides de células cancerosas de mama para generar microtumores que tengan, potencialmente, características similares al original, lo que llevará a un análisis del perfil de expresión de moléculas que incrementan sus capacidades de invasión y metástasis in vitro e in vivo. Utilizando líneas celulares y biopsias, se utilizarán protocolos de bioimpresión de tejidos para generar microtumores que en primer término, se analizarán a nivel transcriptómico utilizando RNAseq y PCR en tiempo real, enfocados en las quimiocinas que son moléculas guías en el transporte celular. Para evaluar la mayor o menor expresión de la proteína, se analizará la citometría e inmunofluorecencia. Para verificar si dichas proteínas son funcionales en estas células, se realizarán ensayos de migración e invasión. Finalmente, en los modelos in vivo, se verá la correlación de los hallazgos in vitro y el análisis histológico de órganos principales que sufren comúnmente metástasis por este cáncer. El objetivo general, por tanto, es determinar el perfil molecular de invasividad y metástasis del modelo de organoides 3D de cáncer de mama in vitro e in vivo. Para ello se va a 1): desarrollar cultivos de organoides 3D de líneas tumorales de cáncer de mama y de cultivos primarios, 2) comparar la expresión genética de quimiocinas y sus receptores en diferentes condiciones de estímulos inflamatorios en los organoides 3D in vitro, 3) evaluar la expresión de las quimiocinas y sus receptores en el organoide 3D comparando su expresión en diferentes condiciones, 4) analizar la compartimentalización de las quimiocinas y sus receptores en el organoide 3D y 5) determinar la actividad funcional (invasión y metástasis) de los receptores de quimiocinas en modelos in vivo implantados con los esferoides 3D. Los resultados esperados son: 1. Optimizar los modelos 3D del cáncer de mama 2. Generar un perfíl molecular de invasividad y metástasis basado en quimiocinas y sus receptores 3. Sugerir mecanismos que puedan servir como futuros blancos interesantes para terapia biológica del cáncer. Asimismo, los resultados bibliográficos esperados por las Bases que rigen al convenio son: 2 tesis de postgrado presentadas para sustentación; y, 2 artículos aceptados en revistas indizadas en Scopus o WoS en Q1 o Q2. El presente proyecto busca generar un mayor conocimiento en la biología del cáncer de mama que ayude a entender los mecanismos de invasión y progresión del tumor, y de esta manera, utilizando un modelo no animal llevar al diseño de nuevas estrategias terapéuticas.