ANÁLISIS EPIGENÉTICO EN CÉLULAS TUMORALES CIRCULANTES Y EN EL ADN CIRCULANTE TUMORAL PARA LA BÚSQUEDA DE BIOMARCADORES EN CÁNCER DE MÁMA: BIOPSIAS LÍQUIDAS

El CMTN tiene peor pronóstico, alto riesgo de desarrollar metástasis y posee diferencias biológicas notables en comparación con otros subtipos de cáncer de mama. La necesidad de evaluar la evolución de la enfermedad, capacidad de producir metástasis, su pronóstico y respuesta al tratamiento de forma rápida y específica para cada paciente se convierte en requisito indispensable. Muchos tumores malignos no tienen un biomarcador de proteína fiable, y cuando los tienen carecen de especificidad y pueden ser elevados como resultado de situaciones clínicas no relacionadas con el crecimiento del tumor o la progresión. Los biomarcadores circulantes, como la combinación del estado de metilación de ciertos promotores y genes supresores de tumores de CTCs y ADNtc, podría implementarse como marcadores de la dinámica tumoral para el desarrollo de nuevos tratamientos moduladores de metilación. Hipótesis El tumor primario no es estático, cambia constantemente en el tiempo y con los tratamientos, sin embargo, para su evaluar su estado las aproximaciones disponibles son las imágenes médicas, biopsias y cirugías para determinar la patología del mismo, debido a lo mismo, la información que se obtiene no es exacta para cada momento de la enfermedad. Nuestra hipótesis se basa en la posibilidad de identificación de una combinación de promotores, genes supresores de tumores u otros genes como de pluripotencia (cancer stem cell) o diferenciación celular en las células tumorales circulantes (CTCs) y en el ADN tumoral circulantes (ADNtc) que presenten patrones de metilación distinta del tumor primario para su uso como biomarcadores de invasión y metástasis de forma específica para cada paciente, en una muestra no invasiva como es una biopsia líquida. Los resultados ayudarían a identificar pacientes peruanos que puedan beneficiarse en el fututo de terapias blanco dirigidas con agentes inhibidores de metilación de forma específica. Nuestros resultados esperan identificar una combinación de promotores, genes supresores de tumores o genes relacionados con invasión y pluripotencia que presenten metilación aberrante del DNA en el tumor primario, CTCs y ADNtc de pacientes con CM, sin embargo, encontrando diferencias entre el perfil del tumor primario y el perfil de las CTCs y el ADNtc. Radpour et al., evaluaron el estado de metilación de más de 31248 sitios CpG de 10 genes en 126 casos de cáncer de mama en muestra control de tejido sano, muestra tumor primario de mama y muestra de ADNtc. En el estudio encontraron un perfil hipermetilado en 7 genes (APC, BIN1, MP6, BRCA1, CST6, P16 y TIMP3) en el tumor primario de mama y en la muestra de ADNtc, pero no en la muestra control de tejido sano. Nosotros esperamos confirmar estos resultados y encontrar hipermetilación en otros genes adicionales como promotores, genes supresores de tumores, genes de diferenciación celular y de pluripotencia realizando un análisis por agrupamiento jerárquico (del inglés, hierarchical clustering) para comparar el estado de metilación del ADN entre el tejido sano, tumor primario, CTCs y ADNtc en CM. La información obtenida en el presente proyecto permitirá el empleo de nuevos biomarcadores circulantes en la práctica clínica. El desarrollo de biomarcadores circulantes tumorales mediante la realización de biopsias liquidas (CTCs y ADNtc) se ha realizado con éxito en países como México y Brasil. El estudio del tumor a través de la sangre tiene ventajas sobre la biopsia tumoral porque nos brinda información sobre el grupo de células neoplásicas con capacidad de realizar metástasis. Estos resultados tendrán aplicación directa a los pacientes con cáncer en muy corto tiempo, mejorará la calidad de la información que los oncólogos clínicos dispondrán y permitirá el desarrollo de metodologías a patentar.

UK - E041-2015-03 Proyectos de investigación básica y aplicada (Fondo UK)