DESARROLLO DE UN PROTOTIPO DE PRUEBA RÁPIDA BASADO EN NANOANTICUERPOS RECOMBINANTES PARA EL DIAGNÓSTICO TEMPRANO DE PESTE EN EL PERÚ

Problema a investigar: La peste es una infección zoonótica bacteriana aguda, que afecta principalmente a poblaciones alejadas y pobres y es una de las enfermedades desatendidas en el mundo. La forma neumónica está sujeta al Registro Sanitario Internacional, con potencial epidémico, alta letalidad, impacta en los sistemas de salud pública, debilita el comercio y el turismo internacional. Actualmente se necesita fortalecer la vigilancia de laboratorio, como estrategia para el control y prevención de la peste en el Perú. Justificación y relevancia Una Directiva de la OMS sobre eliminación de las enfermedades desatendidas y otras infecciones relacionadas con la pobreza entre las que se encuentra incluida la peste, que proponía como meta para el 2015 la eliminación de la peste como problema de salud pública. Para enfrentar la situación epidemiológica actual de nuestro país, se requiere del fortalecimiento de los servicios de salud, para garantizar una atención oportuna y de calidad en los casos de peste, dada la circulación de Yersinia pestis en roedores y pulgas en varias regiones del norte del país, especialmente en la Libertad. Objetivo: Desarrollar y evaluar un prototipo de prueba rápida para el diagnóstico temprano de la peste. Metodología: Se generará una librería de genes de nanoanticuerpos (VHH) contra el antígeno completo de Y. pestis, y se seleccionará los nanoanticuerpos afines al antígeno por phage display. Se evaluará la especificidad y sensibilidad de los nanoanticuerpos por el antígeno de Y. pestis, comparado a otras bacterias patógenas por ensayo ELISA, y se seleccionarán el nanoanticuerpo detector y el de captura. El nanoanticuerpo detector será conjugado a nanopartículas de oro y el nanoanticuerpo de captura será fijado a las tiras reactivas. Las tiras reactivas serán evaluadas para la detección de diferentes cepas de Y. pestis, primero a partir de cultivo y luego se evaluará la sensibilidad de la prueba comparada con el cultivo y con PCR. Objetivos general: - Desarrollar un prototipo de prueba rápida para el diagnostico temprano de peste en el Perú y evaluar su desempeño. Objetivos específicos: - Producir nanoanticuerpos eecombinantes especificos para la detección de Yersinia pestis. - Diseñar y producir el prototipo de prueba rápida empleando los nanoanticuerpos recombinantes para Y. pestis. - Evaluar el desempeño del prototipo de prueba rápida para la deteción de Y. pestis. Resultados esperados: Se espera obtener un prototipo de kit de prueba rápida para el diagnóstico temprano de peste en el Perú con una alta sensibilidad y especificidad. Impacto de la investigación: Un posterior escalamiento del prototipo a nivel de lote piloto, para determinar la sensibilidad y especificidad en campo, que no es el alcance del presente proyecto, nos permitirá en un futuro cercano estar en condiciones de brindar al país un nuevo kit de prueba rápida altamente específico y sensible para el diagnóstico temprano de la peste en nuestro país. Además con el desarrollo de este prototipo se pretende dejar instaurado en el Centro Nacional de Productos Biológicos una nueva plataforma tecnológica para un desarrollo tecnológico en la producción de Kits de diagnóstico de pruebas rápidas que pueda ser aplicada para otros patógenos de importancia en salud púbica.