Generación de una línea celular de taenia solium a partir de neoblastos, para estudios de transcriptómica y evaluación de nuevos agentes terapéuticos

Los neoblastos son células totipotentes responsables de la proliferación y maduración de los tejidos que se han caracterizado y aislado en platelmintos como Echinococcus. Otro platelminto, Taenia solium, causa la teniasis humana (intestinal) y la cisticercosis en humanos y cerdos. La infección del cerebro con larvas (quistes) de T. solium resulta en neurocisticercosis, hiperendémica en el Perú; su tratamiento se asocia a efectos secundarios graves o es inefectivo. Se busca identificar, caracterizar y aislar neoblastos de T. solium, aún no descritos, a partir de quistes, para generar una línea celular estable. Esta permitirá identificar genes asociados con su invasión y proliferación, y facilitaría ensayos sistemáticos para desarrollar pruebas de diagnóstico y caracterizar agentes terapéuticos. Se propone evaluar el potencial antihelmíntico de extractos etanólicos de plantas nativas del Perú. Además, ensayos de cocultivo con líneas de neuroblastoma disponibles proporcionarán datos sobre la relación hospedero-parásito, útil para explorar nuevas formas de diagnóstico, tratamiento más seguro y su seguimiento. Para llevar a cabo el proyecto se va a identificar, aislar y purificar neoblastos (colecta de quistes de animales infectados, detección de neoblastos por incorporación de bromo-desoxi-uridina, aislamiento en cultivo por digestión con tripsina y lisis); cocultivos de neoblastos y células humanas (inducción de proliferación de células primarias por contacto con células de epitelio dueodenal y neuroblastoma humano, y fibroblastos como control); y se realizará la Generación de una librería de cDNA (extracción de RNA total y transcripción reversa para detectar genes en expresión). También se llevará a cabo una evaluación de productos naturales como antihelmínticos (enfrentamiento de línea celular con extractos etanólicos y descripción de la viabilidad de los neoblastos luego de 1-3 días de tratamiento). El uso de una línea celular en lugar de quistes colectados de cerdos, los cuales no pueden mantenerse indefinidamente en cultivo, permitirá estudios sistemáticos aplicables al descubrimiento de nuevos blancos y agentes terapéuticos contra T. solium; se favorecería los de menor costo y mayor efectividad. El cultivo de neoblastos permitirá probar con mayor eficiencia la sensibilidad a diferentes drogas directamente sobre ellos o sobre su producto de diferenciación; la línea garantizaría la disponibilidad de material, usualmente limitante, para los ensayos. La influencia del hospedero sobre el desarrollo del parásito es también un campo muy poco explorado que la línea podría favorecer. Es de particular interés encontrar los factores asociados al desarrollo de quistes racemosos, caracterizados por una proliferación desmedida. Igualmente, más adelante, el desarrollo de fármacos con nuevos principios activos que no induzcan efectos secundarios agresivos.

EF-015 - Investigacion Postdoctoral en Perú - Continuadores