Efecto de eflujo del ácido pirazinoico por medio del silenciamiento de genes homólogos por CRISPRi en bombas de eflujo de Mycobacterium tuberculosis en el modelo de Mycobacterium smegmatis.

La tuberculosis pulmonar es una enfermedad infecciosa ocasionada por Mycobacterium tuberculosis. En la actualidad es un problema a nivel mundial con 9 millones de infectados al año. El tratamiento recomendado por la OMS es basado en el uso de drogas de primera línea, que incluyen la rifampicina, isoniacida, etambutol y pirazinamida. Siendo esta última, una prodroga que reduce el periodo de tratamiento de 9 meses a 6 meses y se usa para erradicar la tuberculosis en estado de latencia e infecciosa. Actualmente el 5% de pacientes con TB activa a nivel mundial desarrollan cepas multidrogo resistente (TB-MDR) frente al tratamiento de primera línea. La resistencia frente a PZA mayormente se explica por la presencia de mutaciones en el gen pncA; que codifica para la enzima pirazinamidasa (PZAsa); que es la responsable de convertir PZAa su forma activa, ácido pirazinoico (POA). Sin embargo, se han reportado cepas que son resistentes a PZA sin presentar mutaciones en el gen pncA por lo que se sugiere que las mutaciones presentes en las bombas de eflujo o los targets de unión del POA puedan ser los causantes de la resistencia a PZA. Por ende, en este estudio se silenciara genes homólogos de Mycobacterium Tuberculosis (MTB), haciendo uso de la técnica de interferencia CRISPR, a genes codificantes a bombas de eflujo que estén implicadas en el mecanismo de acción de la PZA, y se evaluará la velocidad de eflujo del ácido pirazinoico (POA), en el modelo in vivo de M. smegmatis, por medio de la prueba de Wayne cuantitativo. El diseño de estudio es analítico, experimental. Se realizará el análisis estadístico de regresión lineal múltiple utilizando Stata v16 para evaluar la correlación que exista entre las variables.

OBANDO BALLARDO ,KEVIN ROGGER