Exploración del perfil de expresión de microRNAs en la transmisión congénita de Chagas

La enfermedad de Chagas, cuyo agente parasitario es Trypanosoma cruzi, es una enfermedad clasificada como endémica en Latinoamérica. Las vías de transmisión son múltiples, sin embargo, frente al control vectorial mediante programas de salud pública, la transmisión congénita ha tomado relevancia al convertirse en la principal vía de transmisión, y debido a que la mayoría de mujeres en edad fértil tienen altas tasas migratorias, se ha vuelto una enfermedad de interés mundial. Los bebés infectados en su mayoría nacen sin mostrar signos clínicos pero pueden desarrollar enfermedades severas años más adelante. Poco se conoce sobre los factores asociados con la transmisión transplacentaria de T.cruzi; estudios previos utilizan líneas celulares y cepas específicas limitando el conocimiento y nivel de comprensión necesarios para implementar nuevas técnicas de diagnóstico o medidas de control, sin embargo, dan luces para seguir la línea de estudio. Se sabe que el mecanismo de invasión de T.cruzi inicia con su adhesión a la células del trofoblasto, mecanismo de defensa física de la placenta, para luego inducir inflamación y apoptosis en las células del sincitiotrofoblasto; mecanismos que ponen en contexto a múltiples vías metabólicas involucradas en procesos de diferenciación celular y la manera cómo se regulan como objeto de estudio. Los microRNAs son moléculas de RNA de 17 a 24 bp en su forma madura, no codificantes, que están involucrados en todos los procesos metabólicos, regulando de manera directa e indirecta la expresión de genes target. En este contexto, el presente estudio tiene como objetivo principal explorar el perfil de microRNAs en la transmisión congénita de Chagas. A fin de lograr este objetivo, el estudio será dividido en una etapa de exploración del perfil de microRNAs, una etapa de verificación técnica, y una etapa de exploración de genes blanco. Durante la primera etapa, se aplicará la técnica de RNA-Seq con el objetivo de identificar los microRNAs diferencialmente expresados en madres infectadas con T.cruzi que transmiten el parásito, en comparación con un grupo de madres infectadas que no lo transmiten (grupo control). Luego, durante la segunda etapa del estudio, se verificará el nivel de expresión de los microRNAs diferencialmente expresados mediante ensayos de RT-qPCR individuales. Finalmente, durante la última etapa, las secuencias de los microRNAs verificados serán ingresadas en al menos 3 bases de microRNAs públicas a fin de identificar los genes diana de estos microRNAs, y se realizará un análisis de ontología génica (GO) y un análisis de enriquecimiento de vías de señalización (KEGG) con el objetivo de determinar la posible función que ejercen y posibles las vías en las que éstos se encuentran involucrados. Adicionalmente, durante esta misma etapa, se empleará la data obtenida del RNA-Seq para realizar un análisis de expresión diferencial para los genes diana.