DESARROLLO DE UN WESTERN BLOT PARA EL DIAGNÓSTICO SIMULTÁNEO DE LOS VIRUS VIH Y HTLV

Introducción: En el Perú sólo se realiza la vigilancia del VIH y no del HTLV. El HTLV es un virus que se transmite a través del sexo, contacto con sangre y principalmente por la lactancia materna. Las personas infectadas con éste virus suelen desarrollar cáncer (leucemia/linfoma), paraplejia de las piernas, dermatitis infectiva y otras enfermedades severas. Existen escasas marcas de kits (reactivos) comerciales para el diagnóstico confirmatorio del VIH y del HTLV, las cuales presentan costos elevados (3500 soles/18 muestras); Investigadores del INS han logrado producir 2 kits de western blot in house a bajo costo para la confirmación del VIH y también del HTLV, presentando estas pruebas un buen rendimiento diagnóstico. Ambas infecciones en un país de elevada prevalencia deberían ser direccionadas a diagnosticarse simultáneamente, pues si se desarrollara una prueba dual, involucraría una vigilancia no sólo de VIH sino también de HTLV, especialmente en el control prenatal para evitar la trasmisión de madre a niño. Problema a investigar: En el Perú la infección por VIH y HTLV son de elevada prevalencia; ambos retrovirus comparten similares vías de transmisión, de allí que existen reportes de hasta 18.6% de coinfección VIH-HTLV. Para confirmar VIH o HTLV existen escasas marcas de kits comerciales importados de Inmunoblot y/o Western blot, los cuales tienen costos muy elevados; Justificación y relevancia: Nuestro equipo investigador a través de dos proyectos ha logrado estandarizar y producir a bajo costo: western blot para la detección de VIH y western blot para la detección de HTLV; siendo la sensibilidad y especificidad para VIH: 98% y 100% y para HTLV: 94% y 98% respectivamente. Ambas infecciones en un país de elevada prevalencia deberían ser direccionadas a diagnosticarse simultáneamente, pues disponiendo de esta prueba dual, involucraría una vigilancia no sólo de VIH sino también de HTLV, especialmente en el control prenatal para evitar la trasmisión vertical. Método de Investigación: Se realizará un estudio observacional, descriptivo – transversal, de evaluación de una prueba diagnóstica. Se cultivará Células MT2 y Células HTLV-IIIB, las cuales serán sonicadas para obtener las proteínas antígénicas de los virus del VIH y del HTLV; se prepararán las tiras impregnadas con los antígenos, usando el método SDS – PAGE (electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato sódico). Se determinará la sensibilidad, especificidad diagnóstica y analítica, repetibilidad y reproducibilidad usando sueros de Referencia positivos y negativos a VIH y/o HTLV y sueros interferentes. Hipótesis: La prueba de western Blot dual para diagnosticar simultáneamente los virus VIH-1 y HTLV-1 es comparable a la prueba de referencia. Objetivo General: Desarrollar un western blot dual para diagnosticar simultáneamente los virus VIH-1 y HTLV-1. Objetivos Específicos: Diseñar la prueba dual western blot para diagnosticar simultáneamente los virus VIH-1/HTLV-1; Determinar la sensibilidad, especificidad, repetibilidad y reproducibilidad de la prueba dual western blot VIH-1/HTLV-1. Resultados esperados: se espera contar con una prueba de diagnóstico confirmatorio (western blot) de buena sensibilidad y especificidad, es decir de buen rendimiento diagnóstico para detectar simultáneamente los virus VIH y HTLV. Asimismo, se espera también que ésta prueba desarrollada podrá procesarse sin inconvenientes en cualquier laboratorio de la costa, sierra y selva del Perú; es decir se espera que la prueba dual de western blot presente una alta y aceptable concordancia de repetibilidad y reproducibilidad. Se pretende también que ésta prueba sea económica, es decir de bajo costo frente a las marcas de western blot que se comercializa para detectar VIH o HTLV. Impacto de la investigación; los resultados obtenidos serán útiles para proponer algoritmo de diagnósticos nuevos en la vigilancia de ambos retrovirus.