"Desarrollo de una prueba rápida en formato Lateral Flow Assay (LFA) para el diagnóstico de leishmaniasis tegumentaria americana en centros de atención primaria de salud en áreas rurales endémicas del Perú"

Desarrollar un método de diagnóstico rápido de Leishmaniasis Tegumentaria Americana (LTA) e implementarlo en centros de atención primaria de salud en áreas rurales endémicas del país. El principal atributo será el tiempo de emisión de resultado de laboratorio, el cual estará listo antes de las 24 horas. Este requisito es debido a que los pacientes afectados trabajan dispersos en medios rurales y a distancias que haces necesario el diagnóstico in situ. De otro lado, las características en cuanto recursos materiales y humanos de los centros de atención primaria demanda que el equipamiento para obtener el resultado de laboratorio sea simple y que los recursos humanos a cargo del análisis no demande entrenamiento y reforzamiento periódico del personal técnico que los utilizará de manera rutinaria. Construiremos para ello un dispositivo de Lateral Flow Assays (LFA) que es la tecnología de inmunocromatografía predominante a nivel global por su sencillez, reproducibilidad y estabilidad a las condiciones de medio ambiente más diversas. Ello requiere escoger el material de los componentes de la tira diagnóstica (almohadilla de muestra, almohadilla de conjugado, membrana de reacción y almohadilla absorbente), necesarios para su construcción y que logren incrementar al máximo el coeficiente entre la señal de anticuerpo conjugado respecto a la señal inespecífica de fondo causado por interacciones con el material del dispositivo LFA. Optimizaremos la unión irreversible de los antígenos opH2A y opLiP2a, los que serán la diana de los anticuerpos presentes en de un lado los oligopéptidos que han sido ya validados como herramienta de diagnóstico por ELISA. El formato de unión de los oligopéptidos considera la opción del uso de moléculas portadoras (carriers) para facilitar la unión a matrices sólidas. El desempeño del sistema de diagnóstico será comparado con un sistema equivalente pero basado en antígenos crudos de Leishmania. Evaluaremos el desempeño del LFA desarrollado en nuestro laboratorio en manos de investigadores de la Entidad Asociada, quienes han sido ajenos al desarrollo del LFA. Ello implica desarrollar un material didáctico para el entrenamiento, el simplificar los protocolos a un nivel de complejidad intermedia, el calificar el desempeño del LFA en personal altamente capacitado pero ajeno a los desarrolladores del LFA y finalmente el ensayar los parámetros de precisión diagnóstica mediante la evaluación de muestras de pacientes de la ciudad del Cusco, sede de la Entidad Asociada. Transferiremos y evaluaremos el empleo de los dispositivos LFA en centros de atención primaria pobremente equipadas en áreas endémicas de Leishmaniasis del Cusco y de Huánuco (ver Ayuda Memoria de Ambiente). Ello permitirá obtener los valores de sensibilidad y especificidad diagnósticas y los valores predictivos positivos y negativos (PPV y NPV de sus siglas en inglés). En resumen, desarrollaremos un prototipo LFA que sea una prueba rápida de diagnóstico, robusto, de alta calidad, que presente un rendimiento óptimo de diagnóstico y que su uso sea amigable para personal de salud con formación básica de los centros de atención primaria de salud con equipamiento escaso. Los oligopéptidos opH2A y opLiP2a, que fueron patentados por nuestro grupo de investigación y validados en el formato ELISA, que es sin embargo un método inadecuado para los centros de atención primaria que predominan en las áreas endémicas de Leishmaniasis. Para ello es que se seguirán en orden secuencial los tres siguientes objetivos específicos que se detallan en la sección correspondiente de la propuesta.

Leishmaniasis cutánea, pruebas-rápidas-diagnóstico, Lateral Flow Assay, inmunocromatografía, oligopéptidos, centros atención primaria de salud

INVESTIGACIÓN CIENTÍFICA

BM

LIMA

UNIVERSIDAD

PERÚ

INGENIERÍA Y TECNOLOGÍA / INGENIERÍA MÉDICA

PERÚ

LIMA

27/12/2018 al 26/06/2022

TECNOLOGÍA MÉDICA DE LABORATORIO (ANÁLISIS DE MUESTRAS, TECNOLOGÍAS PARA EL DIAGNÓSTICO)