LFA con péptidos y fragmentos antigénicos de proteínas conservadas para el diagnóstico de leishmaniasis tegumentaria en Cusco, Perú

Las leishmaniasis son un espectro de enfermedades con diferentes manifiestaciones clínicas, que van desde lesiones cutáneas que pueden remitir sin ningún tratamiento, pasando por lesiones mutilantes graves de las mucosas nasal/oral hasta manifestaciones viscerales que pueden causar el fallecimiento del paciente. En Perú tenemos las dos primeras manifestaciones clínicas, y para que el paciente reciba el tratamiento necesita del diagnóstico clínico y de laboratorio que confirme la infestación. Los métodos de diagnóstico difundidos a nivel nacional en zonas endémicas se limitan a los exámenes parasitológicos directos, el mismo que tiene poca especificidad y sensibilidad, por lo que es necesario mejorar. Para las leishmaniasis viscerales del viejo mundo, se tienen establecidos kits comerciales de diversos tipos incluyendo los de flujo lateral como una prueba rápida y específica, mientras que para las leishmaniasis tegumentaria americana aún no se cuenta con ninguno. El establecimiento de este tipo de ensayo depende del antígeno que se utiliza y la búsqueda y evaluación de los candidatos es lo que se propone en la presente propuesta. Actualmente contamos con candidatos que han sido previamente evaluados, uno de ellos es la proteína HSP83, cuya región antigénica y discriminadora se encuentra en una región de la proteína, la cual la tenemos clonada en un sistema de expresión, a partir de la misma se pretende diseñar péptidos de tal forma que se acote la región antigénica. Por otro lado, se cuenta con la proteína HSP90 cuyos resultados de antigenicidad previamente han sido establecidos y en la cual se pretende realizar un mapeo antigénico generando fragmentos en base a sus aproximaciones bioinformáticas, estos fragmentos serán clonados en sistemas de expresión. Finalmente, tanto los péptidos como los fragmentos serán evaluados en ensayos de flujo lateral (LFA), porque se trata de sistemas de fácil uso, que no requiere infraestructura ni formación importante. Los ensayos serán evaluados con sueros de pacientes con leishmanisis cutánea y leishmaniasis mucocutánea, los mismos que serán reclutados en centros de atención de los distritos con alta incidencia de la enfermedad del departamento de Cusco, contrastados con sueros de personas que no tienen la enfermedad y personas que nunca han ingresado a regiones endémicas. El proyecto pretende obtener una mejora del diagnóstico de los pacientes con leishmaniasis y se tiene alta probabilidad de conseguirlo porque las moléculas propuestas tienen antecedentes antigénicos y capacidad discriminadora. Finalmente, con la propuesta deseamos formar estudiantes y futuros científicos, a través del acompañamiento de los profesionales que dirigimos el proyecto y de pasantías en centros de investigación de reconocido prestigio, por otro lado se propone realizar formación a grupos de profesionales más grandes a través de un curso de actualización.