Efecto de la pirazinamida en el transcriptoma de Mycobacterium tuberculosis: Búsqueda de nuevos blanco terapéuticos

La pirazinamida (PZA) es la única droga anti-tuberculosa que elimina efectivamente a Mycobacterium tuberculosis de crecimiento lento reduciendo las recaídas de tuberculosis de 20% a 2%. PZA es una droga de mayor interés debido al poco conocimiento en torno a su mecanismo de acción. En el Perú, 50% de los casos TB-MDR son resistentes a PZA con alto riesgo de recaída. La generación de nuevas drogas que eliminen a los bacilos persistentes es una prioridad. La PZA tiene actividad luego de ser convertida a ácido pirazinoico (POA) mediante la acción de la pirazinamidasa codificada por pncA. La teoría que POA mediante ciclos de entrada y salida del micobacterio causa su muerte es aceptada; sin embargo, estudios no concluyentes han reportado que POA puede unirse a una molécula blanco (Rpsa y PanD) e interferir con su función. La resistencia está relacionada principalmente a mutaciones en pncA. Nuestro grupo y otros investigadores reportamos cepas clínicas resistentes sin mutaciones en pncA y cepas con mutaciones en pncA con actividad de pirazinamidasa sugieriendo el efecto de otros genes en la resistencia a PZA. Con la finalidad de conocer el mecanismo de acción de PZA y su efecto en la expresión de genes, estudiaremos el efecto de PZA en el transcriptoma de M. tuberculosis e identificaremos genes relacionados a resistencia a PZA. La función biológica de los genes seleccionados serán estudiados mediante el silenciamiento génico en el sistema de represión transcripcional de CRISPRi. La presencia de metabolitos relacionados con PZA también serán determinados mediante resonancia magnética nuclear. Los resultados nos permitirán conocer genes y rutas metabólicas asociadas a la resistencia a PZA. Los componentes de dichas rutas pueden ser blancos potenciales para nuevas drogas potencialmente activas contra los micobacterios de crecimiento lento. Asimismo, nos permitirá identificar probables biomarcadores para la detección de la resistencia a PZA.